番茄黄化曲叶病毒侵染性克隆的构建

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2015年第6期北京时间：

作者：张玉祥, 袁伦, 郑银英, 向本春

单位：（1 石河子大学生命科学学院 / 农业生物技术重点实验室，石河子 832003；2 石河子大学农学院，石河子 832003）

摘要：为研究番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)的基因功能及相关致病机理，构建了2种TYLCV的侵染性克隆。将两端含有间隔序列(intergenicsequence，IR)的TYLCV全基因组片段分别克隆到质粒pUC57和pCAMBIA2300上得到侵染性隆pTYLCV1.X和pCB2300-1.X。利用质粒pTYLCV1.X直接注射法与pCB2300-1.X的农杆菌浸润法分别接种番茄植株。结果显示：侵染性克隆pTYLCV1.X在注射番茄6周后出现系统症状，侵染效率为23.1%-42.1%；农杆菌浸润法接种的植株4周后观察到明显的病害症状，侵染效率为87.5%-100%。PCR检测结果证明2种侵染性克隆均可在番茄体内产生完整的病毒基因组DNA，实时定量PCR测定病毒浓度可达102个/番茄细胞。以上结果表明，含有2个IR的TYLCV基因组载体具有侵染活性。

关键词：番茄黄化曲叶病毒；侵染性克隆；间隔序列

基金资助：国家自然科学基金项目（31260420、31460466）