牛种布鲁氏菌 2308 紫外诱变株毒力检测及其对昆明系小鼠的免疫效果研究

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2016年第2期北京时间：

作者：张欢 , 江雅丽 , 刘丹 , 黄美玲 , 王杰 , 王远志 , 张辉 , 陈创夫

单位：（1 石河子大学动物科技学院，新疆 石河子 832003；2 石河子大学生命科学学院，新疆 石河子 832003；3 石河子大学医学院，新疆 石河子 832002）

摘要：为了检测牛种布鲁氏菌2308紫外诱变株毒力和免疫效果，本实验以S19疫苗株为对照，用牛种布鲁氏菌基因缺失株紫外线照射组（2308△rwbkA、2308△romp25和2308△rery）和非照射组（2308△wbkA、2308△omp25和2308△ery）分别侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7，对小鼠巨噬细胞内的细菌进行计数评价毒力致弱情况；用牛种布鲁氏菌基因缺失株紫外照射组、非照射组以及S19疫苗株分别以1×107CFU/0.2mL免疫4-6周龄昆明系小鼠，通过ELISA检测小鼠血清中布鲁氏菌IgG抗体和IFN-γ细胞因子，同时分离脾脏，CFU计数布鲁氏菌胞内菌数量；用2308强毒株以3×108CFU/0.2mL腹腔感染各组免疫10周后小鼠，脾脏CFU评价各受试组小鼠的免疫效果。结果表明：在细胞水平，紫外线照射后的布鲁氏菌基因突变株其CFU较紫外线非照射组有不同程度的下降，统计学分析无显著性差异（P＞0.05），但均高于S19胞内菌CFU；与S19疫苗株相比，2308△rwbkA和2308△rery紫外线照射组与其对应的2株紫外线非照射组在不同检测阶段，其IgG和IFN-γ含量水平相当，但2308△romp25紫外线照射菌株组在第6、8周，其IgG和IFN-γ含量均高于2308△omp25紫外线非照射菌株组和S19免疫组，统计学分析有显著性差异（0.01＜P＜0.05）；攻毒实验表明：经过紫外照射的romp25缺失株产生的保护力高于其它未经过紫外照射的缺失株，但低于S19疫苗株免疫效果。结论：紫外诱变株romp25毒力进一步降低而且能够产生一定的保护效果。

关键词：牛种布鲁氏菌；紫外线；毒力；保护力

基金资助：国际科技合作项目（2013DFA32380）