甘草酸单克隆抗体的制备及竞争 ELISA 法的建立

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2016年第3期北京时间：

作者：孙培培 , 贾斌 , 石峰 , 郑江伟 , 张永升 , 席继峰 , 王绪海 , 秦炳燕

单位：（1 石河子大学动物科技学院，新疆 石河子 832003；2 石河子大学生命科学学院，新疆 石河子 832003）

摘要：目前针对甘草酸的检测方法存在成本高、效率低的缺点，本研究通过碳二亚胺法合成甘草酸免疫原并制备出高效价高灵敏度的单克隆抗体，以建立一种基于间接竞争法的酶联免疫检测技术。本研究对常见甘草类型进行甘草酸含量测定并用HPLC法验证。结果表明：抗体效价>5×104，纯化抗体的蛋白浓度为10.03mg/mL。竞争ELISA法的最小检测极限为1.62ng/mL，检测范围为1.62-200ng/mL。ELISA方法测定的数据与HPLC方法测定的数据有很好的相关性。该方法具有简单快速，效率高，成本低的特点，对甘草酸的含量测定有重要意义。

关键词：甘草；甘草酸；单克隆抗体；竞争法；酶联免疫吸附测定

基金资助：石河子大学重大科技攻关计划项目（GXJS2012-ZDGG06-05）