小白杏自交不亲和 S-RNase 基因 RNAi 表达载体的构建及遗传转化

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2016年第4期北京时间：

作者：刘小芳 , 冯建荣 , 刘海楠 , 罗明 , 郭明星 , 谢晓婷

单位：（1 石河子大学农学院，特色果蔬栽培生理与种质资源利用兵团重点实验室，新疆 石河子 832003；2 西南大学生物技术中心，农业部生物技术与作物品质改良重点开放实验室，重庆 北碚 400715）

摘要：为了应用RNAi技术调控杏自交不亲和性状，根据自交不亲和S66-RNase基因序列（GenBank登录中）设计特异引物，通过RT-PCR扩增S66-RNase基因（GenBank登录中）高变区及下游（63bp）作为靶基因，构建RNAi表达载体的ihpRNA。以植物表达载体pCAMBIA为骨架载体，利用农杆菌介导的方法转化本氏烟，利用子房转化法转化小白杏。结果显示：获得了长度为439bp的ihpRNA。表达载体酶切检验表明S66-RNase基因的RNAi表达载体构建和转入农杆菌LBA4404成功。通过抗性筛选和GUS染色检测，获得了16株阳性植株。结论：获得转基因烟草植株证明了本研究构建的RNAi植物表达载体有效，为诱导杏S-RNase基因转录后基因沉默、获得自交亲和的杏提供参考。

关键词：We aimed to regulate self-incompatibility in apricot by RNAi technology in this study. The hypervariable region and downstream (63 bp) of S66-RNase gene based on the S66-RNase gene sequence of 'Xiaobaixing' apricot was selected as target gene

基金资助：国家自然科学基金项目(31272129)