陆地棉 GDP-L- 半乳糖磷酸化酶基因启动子的克隆及活性分析

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2016年第4期北京时间：

作者：左晓宇, 梁卓, 安晶, 潘泽, 李鸿彬,

单位：（1 石河子大学生命科学学院，新疆 石河子 832003; 2 石河子大学农业生物技术重点实验室，新疆 石河子 832003）

摘要：抗坏血酸(Ascorbicacid，AsA)在植物发育和响应逆境胁迫过程中发挥着重要作用。GDP-L-半乳糖磷酸化酶(GDP-Lgalactosephosphorylase,GGPase)是AsA合成过程中关键酶之一，在AsA的生物合成和代谢调控中具有重要作用。为深入了解棉花GhGGPase基因的表达调控模式，本研究利用PCR技术克隆得到GhGGPase基因起始密码子上游2464bp的启动子序列，序列分析发现该启动子包含多个参与激素信号、光调节和抗逆信号应答的顺式作用元件。构建pGhGGPase::GFP-GUS过量表达载体，采用农杆菌介导法瞬时转化烟草叶片，进行GUS组织化学染色和酶活性检测，GUS染色实验结果显示，瞬时转化启动子的烟草叶片表现出较深的蓝色，并且具有较高的酶活性表达，这表明GhGGPase启动子能够显著的驱动GUS的表达。以上结果表明：GhGGPase启动子是一个完整的功能序列，具有较强的表达活性。

关键词：陆地棉；抗坏血酸合成；半乳糖磷酸化酶；启动子；GUS

基金资助：国家自然科学基金(31260339)，兵团杰青项目（2014CD003）和兵团种质资源创新项目（2012BB050）