ＬＰＡ 对人结肠腺癌 Ｃａｃｏ２ 细胞 ＳＬＣ２６Ａ３表达的影响

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2016年第5期北京时间：

作者：胡 慧 ＼ 王艳 Ｓ 杨奉天 ＾ 龚先锋 ２ , 张洋 ２ , 徐丽红 ＼ 郑 勇 ＆

单位：（ １ 石河子大 学 医 学 院第一附属 医 院 消 化 内 科 ， 新疆 石 河子 ８ ３ ２ ００２ ；２ 石 河子大学 医 学 院 第一附属 医 院肝胆外科 ， 新疆 石河子 ８ ３ ２ ００２ ）

摘要：为探讨溶血磷脂酸（ＬＰＡ）对溶质载体２６Ａ３（ｓｏｈｉｔｅｃａｒｒｉｅｒ２６Ａ３＇ＳＬＣ２６Ａ３或ＤＲＡ）在Ｃａｃ〇２细胞中细胞内定位及蛋白表达的影响。采用构建ｐｍＥＳ２－ＺｓＧｒｅｅｎｌ－ＳＬＣ２６Ａ３质粒，转染Ｃａｃｏ２细胞，Ｇ４１８筛选获稳转ｐＩＲＥＳ２－ＺｓＧｒｅｅｎｌ－ＳＬＣ２６Ａ３Ｃａｃ〇２细胞。设立未处理的Ｃａｃ〇２细胞组（Ｃａｃ〇２组）、转染空质粒的Ｃａｃ〇２组（ＮＰ－Ｃａｃ〇２组）、转染ＳＬＣ２６Ａ３质粒的Ｃａｃｏ２组（ＳＬＣ２６Ａ３－Ｃａｃｏ２组）、ＬＰＡ处理的转染空质粒的Ｃａｃｏ２组（ＬＰＡ＋ＮＰ－Ｃａｃｏ２组）和ＬＰＡ处理的转染ＳＬＣ２６Ａ３质粒的Ｃａｃ〇２组（ＬＰＡ＋ＳＬＣ２６Ａ３－Ｃａｃ〇２组），以ＬＰＡ与Ｃａｃ〇２细胞共孵育１２ｈ为观察时间点（ＬＰＡ浓度为ｌＯＯｐｍｏＬ／Ｌ），利用细胞免疫荧光实验观察Ｃａｃ〇２细胞中ＳＬＣ２６Ａ３的定位分布，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测Ｃａｃ〇２细胞中ＳＬＣ２６Ａ３蛋白的表达。结果显示，细胞免疫荧光实验观察结果显示ＬＰＡ＋ＳＬＣ２６Ａ３－Ｃａｃ〇２组ＳＬＣ２６Ａ３细胞膜定位较ＳＬＣ２６Ａ３－Ｃａｃｏ２组的略有增加；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测结果显示ＬＰＡ＋ＮＰ－ＣａＣ〇２组的糖基化ＳＬＣ２６Ａ３蛋白表达量较Ｃａｃｏ２组与ＮＰ－Ｃａｃ〇２组的均增加，有统计学意义（相对３－ａｃｔｉｎ的表达量，ＬＰＡ＋ＮＰ－Ｃａｃｏ２组ｖｓ．Ｃａｃｏ２组：０．８３±０．４４６ｖｓ．０．１４±０．０５０，Ｐｂ〇．０１８；ＬＰＡ＋ＮＰ－Ｃａｃｏ２组ｖｓ．ＮＰ－Ｃａｃｏ２组：０．８３士０．４４６ｖｓ．０．２９±０＿０３２，Ｐ＝０．０４４）。由此可知，ＬＰＡ可促进ＳＬＣ２６Ａ３在Ｃａｃｏ２细胞的细胞膜定位和蛋白表达，从而为ＬＰＡ作为治疗结肠炎相关性腹泻的候选药物提供更多理论依据。

关键词：溶 血 磷 脂 酸 ； 溶 质 载 体 ２ ６ Ａ ３ ； Ｃ ａｃ 〇２

基金资助：石 河 子 大 学 高 层 次 人 才 科 研 启 动 项 目 （ ＲＣ ＺＸ２０ １ ４４３ ）