细粒棘球六钩蚴副肌球蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2017年第3期北京时间：

作者：袁方园 , 贾斌 , 王绪海 , 杜迎春 , 孙丽蓉 , 李鑫 , 李亚强 , 沈文

单位：（1 石河子大学动物科技学院，新疆 石河子 832003；2 水生野生动植物救护中心，北京 102100；3 农畜产品质量安全中心，内蒙古 通辽 028000）

摘要：为了表达、纯化细粒棘球六钩蚴副肌球蛋白及制备多克隆抗体，本研究构建细粒棘球六钩蚴副肌球蛋白原核表达载体pET30a-M26，转化至大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达，SDS-PAGE切胶纯化的副肌球蛋白，免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体，并用Westernblotting和ELISA对副肌球蛋白及抗体进行检测。结果显示：成功表达并纯化了细粒棘球六钩蚴副肌球蛋白，重组蛋白分子质量约41kD，纯化后目的蛋白纯度可达85%，蛋白浓度为0.5mg/ml。副肌球蛋白可与所制备的多克隆抗体结合，ELISA测定的抗体效价为1∶12800，结果表明，成功表达并纯化了六钩蚴副肌球蛋白。本研究可为研究包虫病早期诊断奠定了基础。

关键词：副肌球蛋白；原核表达；多克隆抗体；六钩蚴

基金资助：国家自然科学基金项目（31260535），石河子大学优秀青年科技培育计划项目（2013ZRKXYQ13），石河子大学优\r\n秀青年项目（2012ZRKXYQ01）