LPXTG 基序蛋白 lmo0160 基因缺失对单增李斯特菌生物膜形成的影响

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2017年第6期北京时间：

作者：张奇文 , 凌晨 , 马勋 , 薄新文 , 杜冬冬 , 钱凌霄 , 李红欢

单位：（1 石河子大学动物科技学院，新疆 石河子 832003； 2 新疆天康畜牧生物技术股份有限公司，新疆 乌鲁木齐，830013；3 省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室/新疆农垦科学院，新疆 石河子 832000）

摘要：为了研究致绵羊脑炎单增李斯特菌新疆分离株LM90SB2的LPXTG基序蛋白lmo0160基因对生物膜形成能力的影响，本研究利用基因重叠延伸PCR（SOE-PCR）及同源重组技术，使用穿梭质粒pKSV7载体，构建lmo0160基因缺失株LM90SB2-lmo0160。通过测定OD600绘制生长曲线，利用结晶紫染色测定OD570定量检测生物膜形成能力，在显微镜下观察生物膜的形态。结果显示：与LM90SB2菌株相比，LM90SB2-Δlmo0160在37℃培养条件下生长速度显著降低(P＜0.01)。LM90SB2和LM90SB2-Δlmo0160在不同时间点均形成网格结构的生物膜，但生物膜的致密度和OD570有不同。显微镜下LM90SB2-Δlmo0160形成松散，稀薄的生物膜，LM90SB2生物膜致密，浓厚。不同时间点LM90SB2-Δlmo0160OD570值均小于LM90SB2，8和12h差异不显著(P＞0.05)；24h差异显著，(P24h＜0.05)；48h差异极显著（P48h＜0.001）。本研究表明，Δlmo0160基因对LM90SB2生长增殖和生物膜形成具有一定的影响作用，这为进一步阐明LM毒力因子的致病机制提供理论依据。

关键词：单 增 李 斯 特 菌；lmo0160 基 因；缺 失 株；同 源 重 组 ；生 物 膜

基金资助：国家自然科学基金项目(31360614)