牛病毒性腹泻病毒（BVDV）E0 蛋白原核表达及间接 ELISA 方法的建立
来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2018年第1期北京时间：
作者：丁金花 , 马旭升 , 蔡卓轩 , 肖盛中 , 吴鹏 , 盛金良 , 陈创夫
单位：1 石河子大学动物科技学院，新疆 石河子 832003；2 石河子大学生命科学学院，新疆 石河子 832003
摘要：牛病毒性腹泻病毒（BVDV）能够引起牛羊的持续感染，临床上很难对其根除，建立该病有效检测方法对净化畜群具有重要意义。本研究构建BVDVE0蛋白基因重组表达载体在大肠杆菌中诱导表达，用重组的E0蛋白为包被抗原，确定抗原最佳包被浓度为5μg/mL，最佳血清稀释比为1∶10，最佳封闭液为5%脱脂奶粉，最佳封闭条件为37℃封闭2h，酶标二抗稀释度为1∶5000，作用时间为30min，样品临界值X+2S为0.278。该方法与IDEXX的BVDV间接ELISA试剂盒比较总符合率为86%，与口蹄疫病毒、牛支原体、牛传染性鼻气管炎病毒、牛副结核、牛布鲁氏菌病阳性血清无交叉反应。该检测方法能够用于BVDV抗体水平的临床检测，可为感染病畜的合理淘汰提供实验依据。
关键词：牛病毒性腹泻病毒；E0 重组蛋白；间接 ELISA
基金资助：国家自然科学基金项目（U1303283）
