布鲁菌感染细胞 NF- κB 的表达水平检测及其干扰方法研究

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2018年第3期北京时间：

作者：荆明龙, 李敏, 王小凤, 李明奇, 霍凤娇, 张豫, 刘良波, 张静, 张辉

单位：（石河子大学动物科技学院，新疆 石河子 832000）

摘要：目的本文针对布鲁氏菌侵染宿主细胞过程中NF-κB的表达进行检测，并比较siRNA和shRNA对RAW264.7细胞中NF-κB表达沉默效果。方法根据NF-κBP65基因序列，设计siRNA干扰序列，通过干扰RAW264.7细胞筛选效率较高的siRNA设计shRNA序列，siRNA和shRNA同时干扰布鲁氏菌侵染的RAW264.7细胞，使用RT-PCR方法检测NF-κBP65基因的相对表达情况。结果与阴性对照mock组相比，P65-shRNA组表达降低；P65-siRNA组P65表达低于P65-shRNA组，均低于阴性对照mock组；布鲁氏菌侵染组，P65表达显著高于阴性对照组。结论布鲁氏菌侵染组促进了NF-κBP65的表达，P65-shRNA、P65-siRNA组均抑制了NF-κBP65的表达，siRNA可作为基因沉默中快速筛选的工具，在RNA干扰的应用中可与shRNA配合使用。

关键词：布鲁氏菌；siRNA；shRNA；NF- κB

基金资助：新疆兵团国际科技合作项目(GJHZ201709)，新疆兵团优青计划(CZ027202)，国家大学生 SRP 项目(201710759011)