观察在体灌注 SCL 基因重组慢病毒对豚鼠糖尿病膀胱中 ICC 功能的影响

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2018年第4期北京时间：

作者：徐浩 , 钱彪 , 杨立 , 张思源 , 沈志远 , 邵润芃 , 王勤章

单位：（1 石河子大学医学院第一附属医院，新疆 石河子 832000；2 中国人民解放军第四七四医院，新疆 乌鲁木齐 830000）

摘要：目的探究豚鼠糖尿病膀胱病（DCP）在经尿道灌注干细胞白血病（SCL）基因重组慢病毒后所引发的Cajal样间质细胞（ICC）电位活动的改变。方法购买健康雄性豚鼠90只，按照200mg/kg单次腹腔注射1%的链脲佐菌素（STZ），正常喂养12周后，筛选出符合DCP模型标准的的豚鼠并将其随机分为3组：实验组、阳性对照组、空白对照组。实验组经尿道灌注0.2mL滴度为2×107IU的SCL基因重组慢病毒，阳性对照组经尿道灌注0.2mL空慢病毒，空白对照组经尿道灌注0.2mLPBS液。每组在转染后2、7、14、28d这4个时间节点每次处死3只豚鼠，迅速摘取膀胱，选择胶原酶V消融法分离提取初代ICC并继续培养。72h后运用膜片钳技术检测ICC自发及ATP诱发电位活动。结果体外通过胶原酶消融法可分离培养DCP豚鼠膀胱中ICC，运用细胞膜片钳技术观察到在无刺激条件下检测不到ICC的内向电流，而在ATP(100μmol/L)条件激发下可检测到ICC的内向电流。实验组2d时与其他两组内向电流无明显变化，实验组SCL慢病毒转染DCP膀胱7、14、28d时可检测到ICC内向电流比其他两组高（P＜0.05），14d达到峰值350.0±29.9pA，随后降低。阳性对照组与空白对照组随着DCP膀胱持续受损，内向电流逐步降低（P＜0.05）。结论SCL基因重组慢病毒经尿道灌注可成功转染豚鼠DCP膀胱，使受损的膀胱ICC电流幅度逐步增高，说明SCL基因对DCP膀胱中受损ICC功能有部分改善作用。

关键词：干细胞白血病基因；糖尿病膀胱病变；重组慢病毒；Cajal 样间质细胞

基金资助：国家自然科学基金项目（81360120）