橡胶草叶片蛋白质提取方法的选择及双向电泳体系的优化

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2018年第5期北京时间：

作者：李忠晴, 柴武慧, 张云川, 黄叶红, 李金环, 鲁培鑫, 闫洁

单位：（石河子大学生命科学学院，新疆 石河子 832000）

摘要：目的为了建立起橡胶草叶片组织的蛋白双向电泳体系。方法采用5种不同方法提取橡胶草叶片蛋白，并通过蛋白提取率和单向SDS-PAGE电泳的比较，筛选出改良TCA-丙酮沉淀法、酚-乙酸铵沉淀法、Tris浸提法3种方法进行2-DE电泳。结果表明选择改良TCA-丙酮法为最合适的蛋白质提取方法。为进一步优化体系，比较了不同染色方法、上样量和固相pH梯度预制胶条（IPG）的pH范围对双向电泳结果的影响，电泳结果表明使用17cmpH3-10的IPG胶条、上样量为1200μg、考马斯亮蓝染色法能分离得到更多的蛋白点，是橡胶草叶片双向电泳体系的最优条件。结论本研究初步建立了橡胶草叶片蛋白质双向电泳体系，为深入研究橡胶草蛋白质组学提供依据

关键词：橡胶草；蛋白质；双向电泳

基金资助：国家自然科学基金项目（31360060）