牛源致脑炎大肠杆菌多表位抗原的制备及免疫效果的初步评价

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2022年第2期北京时间：

作者：海永慧, 钦倩, 李蓓蓓, 任静静, 马勋, 王鹏雁, 蒋建军

单位：石河子大学动物科技学院,新疆 石河子 832000

摘要：目的为了初步评价基于FimD、PilN和PilV蛋白优势表位设计的重组蛋白免疫保护效果。方法将FimD、PilN和PilV蛋白的优势B细胞表位串联,构建原核表达载体,然后在BL21(DE3)大肠杆菌中进行原核表达及纯化;用弗氏佐剂与重组蛋白充分混匀后免疫小鼠,收集血清,利用间接ELISA方法检测抗体效价,并进行抗原性的检测;三免后进行攻毒保护实验并对小鼠肝脏、脑和脾脏载菌量进行测定。结果重组蛋白主要以包涵体形式表达。Western-blot结果显示出现一条特异性条带,与预期的重组蛋白大小相符,表明成功制备出多表位抗原。重组蛋白免疫小鼠后血清特异性抗体效价高达1:204800。试验组小鼠攻毒后存活率为66%,对照组小鼠肝脏、脑和脾脏载菌量均显著高于试验组。结论重组蛋白具有良好的抗原性和一定的免疫保护作用,具有研发牛源致脑炎大肠杆菌多表位疫苗的潜在价值。

关键词：牛源致脑炎大肠杆菌,B细胞表位,原核表达,免疫保护效果

基金资助：国家自然科学基金-新疆联合基金项目(U1803109)