驴Zfy基因干扰载体的构建及验证

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2023年第4期北京时间：

作者：李梦雨, 孙玉江, 李超程, 吕毅航, 范洪先, 郑新宝, 肖海霞, 贾斌

单位：1 石河子大学动物科技学院,新疆 石河子 832003;<br/>2 青岛农业大学生命科学学院,山东 青岛 266109;<br/>3 新疆畜牧科学院畜牧研究所,新疆 乌鲁木齐 830000

摘要：目的探讨干扰驴Zfy基因的体内外干扰效果。方法根据驴Zfy基因设计合成4段shRNA,并由独立的U6启动子启动,每两个shRNA片段串联组合成干扰载体,体外培养生精细胞检测干扰载体的干扰效率,筛选最佳的干扰载体用于体内验证干扰效果。结果结果显示:构建出2个驴Zfy基因双shRNA串联重组干扰载体CV250-1、CV250-2,细胞水平验证结果表明CV250-1的干扰效率为76.37%±6.36%,差异极显著(P＜0.01);CV250-2的干扰效率为67.73%±4.94%,差异显著(P＜0.05)。成功对CV250-1重组载体进行体内验证,经母体静脉血胎儿游离DNA性别鉴定得到胎儿雌性率为71.05%(P＜0.05)。结论成功构建的驴Zfy基因重组载体CV250-1,可抑制种公驴睾丸组织Zfy基因的表达,细胞水平干扰效率为76.37%,体内试验胎儿雌性率为71.05%,差异显著(P＜0.05)。

关键词：驴,Zfy基因,串联干扰载体,性别控制

基金资助：山东省农业重大应用技术创新项目(SD2019XM008),新疆维吾尔自治区重点研发计划项目(2020B01002-2-1)