雷帕霉素对高糖高脂诱导的MIN6细胞铁死亡的研究

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2023年第6期北京时间：

作者：杨瑞瑞, 王浩, 陆恒, 李海燕, 王同玲, 张丽媛, 郭恒, 丁玉松

单位：石河子大学医学院预防医学系,新疆 石河子 832000

摘要：目的探讨自噬诱导剂能否通过激活自噬减少高糖高脂诱导的小鼠胰岛β细胞铁死亡。方法选取小鼠胰岛瘤MIN6细胞,通过25mmol·L-1高糖联合200μmol·L-1棕榈酸钠(highGlucoseandhighSodiumPalmitate,GP)干预,建立胰岛β细胞损伤模型,在此基础上给予雷帕霉素(rapamycin,RAPA)及铁死亡诱导剂(erastin,Era)干预24h后,用CCK8检测细胞活力;用试剂盒检测细胞亚铁离子、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)及活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)水平;Westernblot检测铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GlutathionePeroxidase4,GPX4)和酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-CoAsynthetaselong-chainfamilymember4,ACSL4)、铁蛋白(Ferritin,FE)及自噬相关蛋白微管相关蛋白l轻链3Ⅱ(Microtubule—associatedprotein1lightchain3,LC3Ⅱ)、P62水平。结果与对照组相比,GP组及Era组MIN6细胞活力、GSH含量、SOD活力均降低,ROS、MDA及亚铁离子增多,GPX4蛋白表达水平降低,ACSL4、LC3Ⅱ、P62、FE蛋白表达升高(P<0.05)。与GP相比,RAPA干预后细胞活力增加,RAPA使亚铁离子、MDA及ROS水平降低,GSH、SOD含量、GPX4、LC3Ⅱ蛋白表达水平升高,ACSL4、P62、FE蛋白表达降低(P<0.05)。结论铁死亡参与GP诱导的MIN6细胞损伤,其机制可能与自噬流阻滞有关。雷帕霉素可改善β细胞铁死亡。

关键词：铁死亡,自噬,高糖高脂,胰岛β细胞

基金资助：新疆生产建设兵团重点领域科技攻关计划项目(2021AB030)