敬钊缨毛蛛肽类毒素JZTX-V中JZ-VF3片段对巨噬细胞炎症反应的抑制作用及机制研究

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2024年第5期北京时间：

作者：刘欣悦, 钱峰

单位：上海交通大学药学院,上海 200240

摘要：目的探究敬钊缨毛蛛肽类毒素JZTX-V中的多肽片段对巨噬细胞炎症反应的抑制作用,并探究相关机制。方法通过免疫印迹法检测来自JZTX-V的3个多肽片段对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的RAW264.7细胞中诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)表达的作用;通过Griess反应检测细胞上清液中一氧化氮(nitricoxide,NO)浓度,通过异鲁米诺化学发光检测超氧化物的产生量;通过实时荧光定量PCR检测细胞中促炎细胞因子mRNA的表达量;通过免疫印迹法检测JZ-VF3对丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase,MAPK)和核因子-κB(nuclearfactorkappa-B,NF-κB)信号通路的影响,并用免疫荧光检测JZ-VF3对p65的核转位的影响。结果与LPS刺激组相比,用JZ-VF3处理RAW264.7细胞可以显著抑制iNOS的激活及NO和超氧化物的产生,还可以抑制细胞中促炎细胞因子的产生。蛋白免疫印迹和免疫荧光实验揭示,JZ-VF3可以抑制MAPK和NF-κB信号通路的激活,以及p65的核转位。结论JZTX-V中的JZ-VF3多肽片段通过抑制MAPK和NF-κB信号通路的激活,从而抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中的炎症反应,具有成为多肽抗炎药的潜力。

关键词：敬钊缨毛蛛,炎症,巨噬细胞,MAPK信号通路,NF-κB信号通路

基金资助：国家自然科学基金项目(82373875)