模板法制备多孔交联脂肪酶聚集体碳酸钙及其特性

来源：农业工程学报杂志2020年第3期北京时间：

作者：苗长林,吕鹏梅,王忠铭,李惠文,杨玲梅,罗文,

摘要：针对传统交联脂肪酶聚集体（cross-linked lipase aggregates，CLEAs）表面密实、比表面积小、无太多孔隙结构、在催化过程中存在扩散限制、影响酶催化效率等问题，该文通过脂肪酶、氯化钙、碳酸钠、硫酸铵共沉淀制备脂肪酶/碳酸钙微球，再加入二硫苏糖醇（dithiothreitol，DTT）进行脂肪酶交联自组装，然后用乙二胺四乙酸二钠(EDTA)去除碳酸钙模板剂，制得多孔交联脂肪酶聚集体微球（p-CLEAs），对其制备条件、结构特征、酶学性质进行研究。结果表明，最佳制备条件为：Ca2+浓度0.35 mol/L、脂肪酶与Ca2+比例5:1、沉淀剂饱和度80%、沉淀pH值为 8、沉淀时间45 min、DTT体积分数0.2%、交联时间40 min。与常规CLEAs相比，所制备的p-CLEAs在甲醇耐受性、热稳定性和pH值稳定性方面均有明显改善，4 ℃保藏6个月，仍保持较高的活性。其结构稳定，形貌、孔道尺寸可调控，呈多孔结构，这种多孔结构使得底物分子更容易进入脂肪酶的活性位点，不仅降低了传质限制，还提高了催化效率，具有较高的催化活性。

关键词：催化剂, 酶, 交联酶聚集体, 脂肪酶, 固定化, 碳酸钙, 多孔