吐温/缓冲液体系中酶法合成 (R)-对氯环氧苯乙烷

来源：精细化工杂志2020年第3期北京时间：

作者：王婷婷

摘要：利用环氧化物水解酶突变体PvEH1Z4X4-59制备了 (R)-对氯环氧苯乙烷 ((R)-pCSO)。以E. coli/pveh1Z4X4-59全细胞作为生物催化剂，在磷酸盐缓冲液体系 (Na2HPO4-NaH2PO4, 100 mmol/L, pH=7.0) 中有效拆分250 mmol/L 对氯环氧苯乙烷 (rac-pCSO) 制备 (R)-pCSO (ees > 99%)。 随后，依据6种非离子型表面活性剂对E. coli/pveh1Z4X4-59全细胞酶活力和对映选择性的影响，筛选吐温-20作为最佳添加剂，构建并优化吐温-20/缓冲液反应体系。在最优反应条件下：吐温-20的添加量为4% (体积分数)，E. coli/pveh1Z4X4-59全细胞的添加量为200 mg/mL和反应时间为12 h，初始底物浓度显著提高至800 mmol/L (123.7 g/L)，获得 (R)-pCSO的ees和产率分别为99%和45.7% (理论产率为50%)，时空产率高达4.71 g/(L·h)。反应体系放大至100 mL后，制备4.5 g (R)-pCSO 的总收率为36.3%。

关键词：关键词：环氧化物水解酶;动力学拆分;(R)-对氯环氧苯乙烷;吐温-20;生物工程

基金资助：中国博士后基金面上项目 (2018M630522)；江苏省研究生科研与实践创新计划项目 (SJCX18_0641)；江苏省青年基金项目(BK20180622)