肠炎型犬细小病毒的分离鉴定及病毒滴度测定

来源：江苏农业科学杂志2018年第第23期北京时间：

作者：吴双; 朱善元; 郭长明; 秦枫; 左伟勇; 王永娟; 洪伟鸣; 王安平

单位：江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室，江苏泰州 225300

摘要：为获得肠炎型犬细小病毒分离株，采集犬细小病毒胶体金初检阳性的3份粪便，采用同步接毒法分别接种猫肾细胞(F81)和犬肾细胞(MDCK)进行分离培养，F81盲传至第2代出现细胞病变，MDCK盲传至第3代出现细胞病变，2种细胞均仅从病料3中分离出1株病毒。采用PCR方法鉴定该分离株为犬细小病毒并命名为CPV3。根据VP2基因核苷酸序列绘制的系统进化树及其推导氨基酸序列的分析，确定CPV3属于CPV-2a亚型。测定CPV3在MDCK中72 h时的组织细胞半数感染量(TCID50)，第5代次(CPV-M-5)和第10代次(CPV-M-10)的TCID50数值分别为10-4.83/0.1 mL和10-5.50/0.1 mL，这为后续测定重组犬干扰素活性试验提供了材料。

关键词：犬细小病毒;细胞病变;CPV-2a亚型;组织细胞半数感染量

基金资助：江苏省青蓝工程项目(编号：00000216047)；江苏省六大人才高峰项目(编号：NY-009)；江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室开放课题(编号：JSKL开放402)；江苏省农业科技自主创新资金［编号：CX(16)1055］。