白花蛇舌草ISSR反应体系的建立与优化

来源：江苏农业科学杂志2018年第第23期北京时间：

作者：高慧新; 严炯艺; 王明杰; 田慧

单位：广西中医药大学，广西南宁 530200

摘要：通过单因素考察结合正交试验的方法，基于反应体系中Taq DNA聚合酶量、DNA模板用量、dNTPs浓度、引物浓度、Mg2+浓度等5因素4水平条件对ISSR反应体系进行优化。白花蛇舌草ISSR-PCR的20 μL最佳反应体系为引物浓度0.562 5 μmol/L，Mg2+浓度2.75 mmol/L，dNTPs浓度0.375 mmol/L，DNA模板量60 ng，Taq DNA聚合酶1.25 U，2.0 μL 10×Taq Buffer，其余用ddH2O补齐。该试验建立并优化了白花蛇舌草ISSR-PCR反应体系，为白花蛇舌草种质资源遗传多态性的研究提供参考依据。

关键词：白花蛇舌草;ISSR;单因素试验;正交设计;遗传多态性

基金资助：广西中医药民族医药传承创新专项(编号：GZBZ16-05)；广西中医药大学中药学优势学科建设课题(编号：ZYX2015001)；壮瑶药协同创新中心项目(编号：桂教科研［2013］20号)；广西壮瑶药重点实验室项目(编号：桂科基字［2014］32号)；广西重点学科(壮药学)项目(编号：桂教科研［2013］16号)；广西八桂学者中药创新理论与药效研究项目。