甘蓝型油菜ALS基因启动子克隆及其瞬时表达分析

来源：江苏农业科学杂志2018年第第23期北京时间：

作者：熊冬琴; 黄子栋; 彭琦; 张维; 张洁夫; 浦惠明; 陈松

单位：1.江苏省农业科学院经济作物研究所，江苏南京 210014； 2.农业部长江下游棉花与油菜重点实验室，江苏南京 210014；3.江苏省现代作物生产协同创新中心，江苏南京 210014；4.江苏农林职业技术学院，江苏句容 212400

摘要：为研究油菜ASL基因(BnALS)启动子的功能，根据油菜基因组信息，提取得到BnASL基因上游区域的碱基序列，通过设计特异性引物对，利用PCR扩增克隆得到大小为1 048个碱基的片段。序列分析结果显示，该序列富含TATA box和CAAT box等启动子核心调控序列，并有多个与逆境、激素、光响应等表达相关的顺式作用元件，如MBS元件、ABRE元件、HSE元件 CGTCA-motif、TGA-motif等。为了进一步研究其启动子功能，将其与β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因融合，构建了植物表达载体p1304-P，通过根癌农杆菌介导法转化烟草(Nicotiana benthamiana)，对PCR阳性的再生烟草苗进行GUS组化分析，检测GUS基因在转基因烟草中的瞬时表达情况。结果表明，克隆的BnASL基因上游序列能够驱动GUS基因在烟草根、茎、叶等组织中的表达，推测油菜ALS基因上游的1 048 bp片段具有组成型表达的启动子功能。

关键词：甘蓝型油菜;BnALS基因启动子'BnALS基因启动子;基因克隆;瞬时表达;验证启动子活性

基金资助：国家重点研发计划(编号：2016YFD0100202-10)。