大豆赖氨酸合成关键酶基因的克隆与定位分析

来源：江苏农业科学杂志2018年第第23期北京时间：

作者：于妍; 姜威; 陈庆山; 邱红梅; 管宇; 蒋洪蔚; 李灿东; 唐敬仙

单位：1.长春科技学院，吉林长春 130600； 2.东北农业大学农学院，黑龙江哈尔滨 150030； 3.吉林省农业科学院大豆研究所，吉林长春 130033；4.黑河出入境检验检疫局综合技术中心，黑龙江黑河 164300； 5.黑龙江省农业科学院佳木斯分院，黑龙江佳木斯 154007

摘要：为了从大豆中克隆DAPD、DAPE和DHDPR 3个大豆赖氨酸合成关键酶基因，并完成其电子定位和结构分析，借助已构建的本地化表达序列标签(expressed sequence tag，简称EST)数据库，与不同物种的对应基因序列进行比对、拼接，同时利用已构建的大豆整合图谱，完成这3个关键酶基因的电子克隆及电子定位。结果表明，RT-PCR克隆、序列分析的结果与预测序列基本一致。通过电子定位，得到这3个基因分别在J、L和N 3个连锁群上。通过对基因的结构分析，得到DAPD、DAPE、DHDPR 3个基因的cDNA长度分别为1 467、1 080、1 035 bp，gDNA长度分别为 4 662、3 728、3 158 bp，外显子数量分别为8、9、8个，内含子数量分别为7、8、7个。研究结果为其他氨基酸合成关键酶基因的克隆提供了参考依据，也为后续基因功能研究以及分子辅助育种打下了良好基础。

关键词：大豆;赖氨酸;合成酶基因;电子克隆;电子定位

基金资助：黑龙江省自然科学基金重点项目(编号：ZD201213)；教育部新世纪优秀人才支持计划(编号：NECT-1207-01)。