16S rRNA甲基化酶RmtB耐药重组菌的
构建及其稳定性研究

来源：江苏农业科学杂志2018年第第19期北京时间：

作者：陈琳; 管远红; 黄东璋; 齐富刚; 魏冬霞; 陈瀛川; 张欢; 王亚南; 苏哲君;张洪涛' target="_blank" rel="external">张洪涛; 区卓麟; 陈冬冬; 吴怀秀; 于淼淼; 杨雨秋

单位：江苏农牧科技职业学院，江苏泰州 22530

摘要：为构建16S rRNA甲基化酶RmtB重组菌并测定其稳定性，应用分子克隆技术构建16S rRNA甲基化酶RmtB重组菌，采用菌落PCR、双酶切、药敏试验及序列分析等方法鉴定重组质粒，测定重组菌的生长曲线及传代后的最低抑菌浓度(MICs)以确定重组菌的稳定性。结果表明，构建了16S rRNA甲基化酶RmtB重组菌pRmtB1、pRmtB2、pRmtB4。重组菌对阿米卡星、庆大霉素高度耐药。在没有抗生素选择压力下传代3次后，3株重组菌的生长曲线基本相似，但只有pRmtB1维持了对庆大霉素和阿米卡星的高度耐药性。由此可知，重组菌pRmtB1较稳定，可作为16S rRNA甲基化酶耐药抑制剂筛选模型。

关键词：16S rRNA甲基化酶;RmtB;重组;分子克隆;耐药性

基金资助：中国博士后科学基金面上项目(编号：2013M541740)；江苏省泰州市科技支撑项目(编号：TN201519)；江苏农牧科技职业学院重点项目(编号：NSF201503、NSF201603)。