褐苞薯蓣ISSR-PCR反应体系的建立与优化

来源：江苏农业科学杂志2018年第第19期北京时间：

作者：高慧新; 封毅; 王孝勋; 吴燕春; 戴忠华; 田慧

单位：广西中医药大学，广西南宁 530200

摘要：通过单因素考察结合正交试验的方法，基于反应体系中Taq DNA聚合酶量、DNA模板用量、dNTPs浓度、引物浓度、Mg2+浓度等因素对简单重复序列间扩增(ISSR)反应体系进行优化。结果表明，褐苞薯蓣ISSR-PCR的 20 μL 最佳反应体系为Taq DNA聚合酶1.875 U，DNA模板量52.5 ng，dNTPs浓度0.25 mmol/L，引物浓度 0.437 5 μmol/L，Mg2+浓度1.5 mmol/L，10×Taq Buffer 2.0 μL，其余用ddH2O补齐。

关键词：褐苞薯蓣;简单重复序列间扩增(ISSR);单因素试验;正交设计

基金资助：广西中医药大学2015年度中药学优势学科建设课题(编号：ZYX2015001)；2017年杨世林教授团队骨干学员科研项目(编号：CS17012)；壮瑶药协同创新中心项目(编号：桂教科研［2013］20号)；广西壮瑶药重点实验室项目(编号：桂科基字［2014］32号)；广西重点学科壮药学项目(编号：桂教科研［2013］16号)；广西八桂学者中药创新理论与药效研究项目(编号：J13162)。