马铃薯野生种Solanum pinnatisectmumgn与栽培种
下寨65原生质体融合与培养研究

来源：江苏农业科学杂志2018年第第18期北京时间：

作者：孙海宏; 王芳; 叶广继

单位：1.青海大学农林科学院，青海西宁 810016； 2.青藏高原生物技术教育部重点实验室，青海西宁 810016

摘要：为获得较佳的原生质体融合培养体系，以野生种马铃薯Solanumpinnatisectmum和栽培种下寨65试管苗叶片为材料，进行原生质体分离纯化与融合培养研究，对2个融合亲本的无菌苗叶片进行原生质体化学融合和电融合。结果表明，采用电融合方式，融合参数为交变电压80 V/cm，成串时间10 s，直流脉冲1 000 V/cm，作用时间 60 μs，脉冲l次，原生质融合效率最高，达到45.72%。融合细胞在液体浅层培养中形成0.1 mm的愈伤组织后，转入到增殖培养基(0.4 mg/L 6-BA+1 mg/L IAA)中培养80 d以上，愈伤组织变为鲜绿色时，移入诱导分化培养基(0.5 mg/LIAA+2.5 mg/L Zeatin)中，愈伤组织在分化培养基上生长约60 d时，开始分化形成小芽，分化频率平均达16.7%，显著好于其他分化处理。

关键词：Solanum pinnatisectmum'马铃薯野生种Solanum pinnatisectmum;栽培种下寨65;原生质体融合;培养

基金资助：青海省科技厅项目(编号：2013-Z-722、2015-HZ-806、2015-GX-Q17A)。