《江苏农业科学杂志》发表论文赏析

改良CTAB方法提取果树不同组织的RNA

来源:江苏农业科学杂志2018年第第15期北京时间:

作者:关玲; 赵密珍; 王庆莲; 吴伟民; 钱亚明; 巫建华

单位:1.江苏省农业科学院果树研究所/江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室,江苏南京 210014;2.江苏现代园艺工程技术中心,江苏句容 212400

摘要:果树多富含多酚、多糖等次生代谢物质。为了解决果树RNA提取工作较为困难的现象,拟改良现有的十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyl trimethyl ammonium bromide,简称CTAB)方法,以将其用于提取多年生草本、藤本及木本果树RNA。经非变性琼脂糖凝胶电泳检测,表明应用该方法可以获得清晰明亮的RNA条带;经核酸分析发现,所提取的RNA的D260 nm/D280 nm值均在1.80~1.93之间,表明该方法可以去除果树中的蛋白质;D260 nm/D230 nm值为2.03~2.27,表明该方法可以去除果树中的多糖及小分子盐离子。结果表明,应用改良后的CTBA方法提取果树不同组织RNA所得到的反转录cDNA可以直接用于后续的逆转录PCR(RT-PCR)试验。

关键词:果树;CTAB;RNA提取;荧光定量RT-PCR

基金资助:国家自然科学基金(编号:31601738);江苏省农业科学院院级基金(编号:6111641)。

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