红色荧光蛋白融合表达载体的构建和
蛋白质细胞内定位研究

来源：江苏农业科学杂志2019年第第08期北京时间：

作者：王文旭; 郁飞

单位：西北农林科技大学生命科学学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室，陕西杨凌 712100

摘要：为进一步研究目的蛋白质在细胞内的定位，构建融合了红色荧光蛋白mCherry或mScarlet的表达载体。选取VTI12、RabD2a、ARA7以及SYP61等4个定位基因来构建红色荧光蛋白融合表达载体。根据TAIR数据库中相关蛋白质的基因序列设计引物，通过PCR技术扩增序列并将其分别连接到已制备好的红色荧光蛋白融合表达载体上，制备得到质粒后转化入原生质体进行瞬时表达。结果表明，成功构建了pUC18HE-NmCherry-VTI12、pUC18HE-NmCherry-RabD2a、pUC18-mScarlet NT-ARA7以及pUC18-mScarlet NT-SYP61等4个红色荧光蛋白融合表达载体，并且成功在拟南芥叶肉细胞原生质体中瞬时表达。

关键词：红色荧光蛋白;融合表达载体;亚细胞定位;瞬时表达

基金资助：国家自然科学基金(编号：31570267)。