《江苏农业科学杂志》发表论文赏析
作者:邹禹; 刘园园; 张培江; 钱宝云; 张炜
单位:1.安徽省农业科学院水稻研究所,安徽合肥 210031; 2.南京农业大学生命科学学院,江苏南京 210095
摘要:为明确水稻富亮氨酸重复类受体蛋白激酶OsRPK1响应外源生长素的作用机制,首先分析外源生长素2,4-D 对OsRPK1转基因水稻根部表型的影响;其次,异源表达OsRPK1胞外富亮氨酸重复LRRs,检测H3-IAA竞争结合融合蛋白GST-LRRs后的放射性活度以及利用等温滴定量热(ITC)法分析IAA与融合蛋白GST-LRRs相互作用的微热量变化。结果表明,在正常生长条件下,OsRPK1过表达能够抑制水稻侧根的生长;0.01 μmol/L 2,4-D处理 4 d 后发现,OsRPK1抑制表达植株侧根的数量比野生型多112%(P<0.01),而OsRPK1过表达植株侧根生长受到极显著抑制(P<0.001);0.1 μmol/L 2,4-D处理10 d后,抑制表达植株不定根的数量相对于野生型多18.2%(P<005),而过表达植株不定根的生长受到显著抑制(P<0.01);大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达获得了包涵体形式的GST-LRRs融合蛋白,通过复性、纯化获得可溶性融合蛋白;H3-IAA竞争结合融合蛋白GST-LRRs以及IAA溶液滴定融合蛋白的微热量分析都表明OsRPK1与外源生长素未发生直接作用。
关键词:水稻富亮氨酸重复类受体蛋白激酶OsRPK1;原核表达;外源生长素;融合蛋白GST-LRRs
基金资助:国家重点研发计划(编号:2016YFD0101801);国家自然科学基金(编号:31701409);安徽省自然科学基金(编号:1408085MKL63);安徽省农业科学院学科建设项目(编号:17A0101)。