泛素基因沉默对TLR4/NF-κB信号通路中
关键分子表达的影响

来源：江苏农业科学杂志2019年第第08期北京时间：

作者：刘超英; 董骎; 高洪; 严玉霖; 富国文; 单春兰

单位：云南农业大学动物科学技术学院，云南昆明 650201

摘要：为了探讨泛素(ubiquitin，简称Ub)对TLR4/NF-κB信号通路中关键分子表达的影响，通过脂质体将短发夹RNA(shRNA)质粒转染猪小肠上皮细胞，使其泛素基因沉默，于转染后6、12、24、48 h收集细胞及其上清。应用荧光定量PCR检测细胞内TLR4/NF-κB信号通路中关键分子TLR4、NF-κB、MyD88、IκB-α的mRNA表达水平，应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测NF-κB、IκB-α及炎性因子TNF-α、IL-1含量的变化。结果显示，shRNA质粒有效地抑制了泛素基因的表达，转染shRNA质粒后，TLR4/NF-κB信号通路中TLR4、NF-κB、MyD88和IκB-α的mRNA表达量及NF-κB、IκB-α、TNF-α和IL-1含量均普遍呈下降的趋势，说明泛素在炎性因子的释放中起着至关重要的作用，泛素基因的沉默能够抑制该通路的活化。

关键词：泛素;基因沉默;信号通路;炎性因子

基金资助：国家自然科学基金(编号：31260594、31660704)；云南省高校科技创新团队支持计划(编号：云教科［2011］14号)；云南生猪产业技术体系建设专项经费(编号：云财农［2009］171号)。