灰霉菌胁迫下番茄叶片cDNA文库构建及SlbZIP1互作蛋白筛选鉴定

来源：江苏农业科学杂志2024年第第18期北京时间：

作者：马燕;韩玉龙;吴兴兴;李爽;丁小雨;杨玉婷

单位：宁夏大学葡萄酒与园艺学院，宁夏银川 750021

摘要：为筛选番茄在灰霉菌侵染下与bZIP转录因子SlbZIP1(Solyc01g008730.2.1)互作的蛋白，以感病番茄Moneymaker为材料，提取接种灰霉菌胁迫处理后0、24、48、72、96 h的番茄叶片的总RNA，通过三框法构建cDNA酵母文库，计算文库库容量、重组效率。同时，以SlbZIP1为诱饵，利用构建的文库探索其在灰霉菌侵染过程中的互作蛋白，并对其中可能参与病原菌防御反应的潜在蛋白在酵母中进行互作验证。结果表明，酵母文库库容达到1.5×106 CFU，重组效率为98%。酵母双杂交共计筛选到14个与SlbZIP1互作的潜在蛋白。进一步互作验证表明，SlbZIP1与谷氧还蛋白SlGRXC9、SlGRXC6、bZIP转录因子SlTGA2.2及钙调蛋白SlCaM1均存在互作。上述结果可为进一步阐明SlbZIP1对腐生型真菌病害的抗病分子机制奠定基础。

关键词：番茄;灰霉菌;cDNA文库;bZIP转录因子;互作蛋白