N端携带HBGAs受体结合表位的兔出血症病毒嵌合VP60蛋白的表达及其免疫原性

来源：江苏农业科学杂志2024年第第12期北京时间：

作者：董文宇;刘维龙;胡波;等

单位：1.西藏农牧学院，西藏林芝 860000； 2.江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程重点实验室，江苏南京 210014； 3.南京农业大学，江苏南京 210095； 4.兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心，江苏泰州 225300

摘要：将HBGAs受体结合表位插入兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白VP60的N端，分析嵌合VP60蛋白的表达及病毒样颗粒(VLPs)形成情况，并研究N端HBGAs受体结合表位的插入对嵌合VP60 蛋白免疫原性的影响。通过VP60蛋白N端起始位点HBGAs受体结合表位的插入，获得表位插入的VP60基因。利用Bac-to-Bac系统构建杆状病毒重组质粒，命名为Bacmid-VP60-CR，转染Sf9昆虫细胞后，得到重组杆状病毒rBac-VP60-CR，经HA、IFA和Western Blot鉴定，结果显示，重组蛋白VP60-CR在Sf 9昆虫细胞中得到高效表达，电镜观察显示其可形成与VP60类似的VLPs结构。将重组蛋白免疫2月龄RHDV血清阴性的新西兰兔，200 μg/只，免疫后每周采血检测HBGAs表位抗体水平，同时在免疫后14 d，以RHDV WF株攻毒观察VP60-CR重组蛋白的免疫保护效果。结果显示，与VP60对照相比，VP60-CR蛋白可产生更高水平的针对HBGAs表位的抗体水平，且VP60-CR免疫兔可完全抵抗RHDV强毒的攻击。本研究构建了一种N端插入HBGAs受体结合表位的嵌合VP60蛋白，为研究高免疫原性兔出血症基因工程疫苗抗原奠定了基础。

关键词：兔出血症病毒;VP60蛋白;HBGAs;病毒样颗粒;免疫原性