基于VIGS技术的烤烟烟碱调控及对烟碱含量的影响

来源：江苏农业科学杂志2024年第第6期北京时间：

作者：杨再军;张丽;张福强;张权;昝建朋;田举要;白茂军;徐世晓

单位：1.河南农业大学烟草学院，河南郑州 450002； 2. 贵州省烟草公司安顺市公司，贵州安顺 561000

摘要：在对烤烟原料要求烟碱含量低的中烟工业企业中，烟碱含量过高的烟叶难以在原料配方中适配，导致工业可用性较低。为了降低烟叶中烟碱的含量，通过病毒诱导基因沉默技术(virus induced gene silencing，VIGS)构建烟碱合成过程中4个关键基因(NtA622、NtPMT、NtBBL、NtMYB305a)的靶向沉默体系，探究瞬时沉默对基因相对表达量及烟碱含量的影响，并对不同载体的沉默效率与烟碱降低率进行贡献度分析。结果表明，通过目标序列靶片段成功构建了基于VIGS技术的沉默载体；T2处理沉默NtPMT基因后，最大沉默效率为55.23%，T3处理沉默NtBBL基因后，沉默效率为50.78%，两者差异不显著；各处理沉默相应基因后，不仅表现出对应基因表达量的下调，同时对本研究中其他基因的表达量也有影响；烟碱降低最多的是T3处理，降低率达到39.34%，同时T3处理沉默NtBBL基因的沉默效率对烟碱降低的贡献度最大，为0.775。本研究建立的VIGS技术体系有效沉默目的基因的表达，沉默NtBBL基因的T3处理沉默效率较高，烟碱含量较低，为调控烟碱含量提供了一种新思路与方法。

关键词：VIGS;烟碱;载体构建;相对基因表达量;病毒诱导的基因沉默