牛传染性鼻气管炎病毒部分gB蛋白的
原核表达及抗原性分析

来源：江苏农业科学杂志2019年第第17期北京时间：

作者：何小丽; 李凡飞; 王文佳; 张凯; 程成; 许立华

单位：宁夏大学农学院，宁夏银川 750021

摘要：为对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)gB基因进行原核表达，并对表达产物进行抗原性分析，利用笔者所在实验室已构建好的gB-BL21重组阳性菌落，进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达，并对培养及诱导表达条件(IPTG最佳浓度、作用时间)等影响表达的因素进行优化，然后将表达的gB重组蛋白进行亲和层析纯化。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明，gB蛋白在大肠杆菌中高效表达，表达蛋白的相对分子量约为32.4 ku，与预期的蛋白大小一致。经BCA(聚氰基丙烯酸正丁酯)蛋白含量测定试剂盒测定，gB重组蛋白浓度为 1.84 mg/mL。Western Blot结果显示，纯化后的gB重组蛋白能被标准IBR阳性血清识别，说明表达的目的蛋白具有良好的反应原性，可作为IBRV检测的特异性抗原。试验为建立牛传染性鼻气管炎诊断方法及研究gB蛋白的功能特性提供了材料和技术理论支持。

关键词：牛传染性鼻气管炎;gB蛋白;原核表达;纯化;抗原性分析

基金资助：国家自然科学基金(编号：31560687、31760722)；宁夏“优质高产奶牛遗传改良与选育”专项(编号：2013NYYZ0501)。