金刚烷胺单克隆抗体的制备和鉴定

来源：江苏农业科学杂志2019年第第15期北京时间：

作者：范素菊; 李嘉; 李森; 杨兴东

单位：1.周口职业技术学院农牧工程学院，河南周口 466000； 2.周口师范学院食品药品检验检测中心，河南周口 466001

摘要：为制备金刚烷胺(AMD)的单克隆抗体(mAb)，改造AMD的半抗原，采用EDC/NHS法合成人工免疫原AMD-BSA和检测抗原AMD-OVA，经紫外扫描和凝胶电泳进行鉴定，AMD与载体蛋白［牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵白蛋白(OVA)］成功偶联；用被免疫原(AMD-BSA)免疫BALBC/c小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合，获得AMD杂交瘤细胞株，腹腔注射小鼠后，得到抗AMD的mAb。小鼠免疫后的多抗血清的效价均在6.4×103以上，所制得的杂交瘤细胞上清液的效价为3.6×102~1.0×103，2D5细胞株的腹水效价为5.12×105，对AMD的IC50值为1.02 μg/L，除与金刚乙胺的交叉反应率为9.82%，与其他结构类似物无交叉反应性。表明获得了高价、敏感和特异的抗AMD的单克隆抗体，为进一步的免疫学快速检测提供了技术支持。

关键词：金刚烷胺;免疫原;单克隆抗体;ELISA;抗体制备;抗体鉴定

基金资助：河南省自然科学基金(编号：182300410093)；河南省科技攻关项目(编号：182102310683)。