筛选GPAT基因的酵母遗传互补体系的优化

来源：江苏农业科学杂志2019年第第13期北京时间：

作者：陈丹丹; 刘宏波

单位：浙江农林大学农业与食品科学学院，浙江杭州 311300

摘要：3-磷酸甘油酰基转移酶(glycerol-3-phosphate acyltransferase，GPAT)是甘油脂生物合成途径中催化第1步酰化反应的关键酶，参与生物体的不同代谢途径，发挥着不同的生理功能。本研究对已构建的GPAT基因酵母遗传互补筛选体系进行优化，通过替换酵母表达载体pYES2-Kan-yADH1 v1中ADH1启动子，增强目的基因的表达；同时，在酵母遗传转化后对菌株进行复苏培养，提高遗传转化效率，增加阳性菌落数目。该体系的优化将进一步提高GPAT酶的筛选效率。

关键词：3-磷酸甘油酰基转移酶;启动子;酵母;遗传互补

基金资助：国家自然科学基金面上项目(编号：31370287)；农业部“948”项目(编号：2014-Z30)。