豆制品转基因检测中不同DNA提取方法的比较

来源：江苏农业科学杂志2019年第第04期北京时间：

作者：孙梦梦; 黄欢欢; 沈晓芳; 庞月红

单位：江南大学食品学院，江苏无锡 214122

摘要：高品质的DNA是分子生物学研究的关键，大豆及豆制品中含有较多的蛋白质、酚类、糖类和脂类物质，从中提取高品质的DNA比较困难。拟采用十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate，简称SDS)法、改良CTAB法、十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyl trimethyl ammonium bromide，简称CTAB)法、SDS-聚乙烯吡咯烷酮(简称SDS-PVP)法和TIANGEN试剂盒法对大豆MON 89788、小黄豆、豆腐及大豆油中的DNA进行提取，对试验过程中的蛋白酶K、RNA酶A的浓度进行优化，并对DNA浓度及纯度进行综合分析。结果表明，对于大豆MON 89788、小黄豆和豆腐，用SDS法提取的DNA的D260 nm/D280 nm值在1.8左右，DNA产量最高，用改良CTAB法提取的DNA的D260 nm/D280 nm值在1.8左右，用TIANGEN试剂盒法提取的DNA的D260 nm/D280 nm值在1.75左右，2种方法的DNA产量均比SDS法低，而用 SDS-PVP 法与CTAB法提取的DNA含有较多杂质。综合分析可知，大豆油的最佳DNA提取方法为改良CTAB法。

关键词：大豆MON 89788;豆制品;DNA提取;琼脂糖凝胶电泳

基金资助：国家自然科学基金(编号：31501397)；江苏省重大科技示范项目(编号：BE2016635)。