《江苏农业科学杂志》发表论文赏析

濒危植物蒙古扁桃SRAP反应体系优化

来源:江苏农业科学杂志2019年第第03期北京时间:

作者:白羽; 丁海麦; 石松利

单位:1.包头医学院药学院,内蒙古包头 014000; 2.包头医学院基础医学与法医学院,内蒙古包头 014000

摘要:为利用SRAP技术研究蒙古扁桃资源遗传多样性评价和种质资源鉴定,利用正交试验法L16(45)正交设计,对影响蒙古扁桃SRAP-PCR反应体系的Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶量、引物浓度4个因素以及模板DNA浓度进行筛选。优化的蒙古扁桃SRAP-PCR最佳反应体系为Mg2+浓度为2.5 mmol/L,dNTPs浓度为 0.25 mmol/L,模板DNA浓度为100 ng,Taq酶浓度为2.00 U,引物浓度1.0 μmol/L,2.5 μL 10×PCR buffer,总体积为25 μL。筛选结果表明,对蒙古扁桃SRAP-PCR扩增结果影响最大的是Taq聚合酶浓度,最小的是dNTPs浓度。运用该体系对144个随机SRAP引物组合进行筛选,筛选出12个条带清晰、多态性高的引物组合,为蒙古扁桃种质资源的研究奠定了基础。

关键词:蒙古扁桃;分子标记;SRAP;正交试验;反应体系;优化

基金资助:国家自然科学基金(编号:81102760);内蒙古自然科学基金(编号:2015MS0808)。

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