普通烟草中TRV介导的烟草基因沉默体系优化及评价

来源：江苏农业科学杂志2025年第第23期北京时间：

作者：李雪君;郭敬;段卫东;孙计平;孙焕;平文丽;申洪涛;俎焕新;李旭辉;侯 咏

单位：1.河南省农业科学院烟草研究所/烟草行业黄淮烟区烟草病虫害绿色防控重点实验室，河南许昌 461000； 2.河南中烟工业责任有限公司，河南许昌450000

摘要：病毒介导的基因沉默(VIGS)是研究植物基因功能的重要技术手段。为了优化与评价普通烟草 TRV-VIGS体系，并为研究烟草关键基因功能提供方法，以八氢番茄红素脱氢酶(PDS)基因为报告基因，以本氏烟作为对照，研究5种侵染方法在中烟100体内的基因沉默效率和效果；并以NtABS作为靶基因，采用荧光定量PCR测定NtABS及相关基因的相对表达量变化进一步比较基因沉默效率。结果发现：(1)5种侵染方法均可100%引起本氏烟白化，方法四与方法五仅在处理7 d后就出现白化表型，方法一、二、三在处理11~12 d开始白化。(2)方法三和方法五可引起普通烟草中烟100白化，白化效率均为80%，白化所需时间均为15 d。(3)中烟100在NtABS基因被沉默后，中烟100叶片中NtABS基因相对表达量在方法五下比方法三降低更显著，NtMALD1、NtCPS2、NtCTP1基因相对表达量在方法五中降低更显著，NtCBTS、NtRbCS基因相对表达量在方法三中降低更显著。方法三和方法五可引起普通烟草中烟100白化，方法五操作较方法三略繁琐、沉默效率略高，2种方法均可应用于构建烟草TRV-VIGS体系。

关键词：烟草;病毒介导的基因沉默;烟草脆裂病毒;八氢番茄红素脱氢酶基因;中烟100;本氏烟