菊花B病毒TaqManMGB探针检测方法构建及病毒在组织间的分布

来源：江苏农业科学杂志2025年第第22期北京时间：

作者：伍静;罗茂婵;施霞;卞弘洁;邵元健;吴雯雯

单位：1.南通科技职业学院园艺与景观工程学院，江苏南通 226007； 2.南通市绿化造园开发有限公司，江苏南通 226000

摘要：菊花B病毒是一种RNA病毒，其具有传播力强和传播途径隐匿等特点，在菊花种植过程中广泛流行，目前尚无有效的治疗药物，严重制约菊花种植产业的高质量发展。建立健康的苗种培育技术是有效的防控手段，但目前菊花B病毒的定量评价体系还不完善，病毒在植株中的分布特点尚不明确。以建立一种菊花B病毒感染严重程度的评价方法，初步阐明其在菊花不同组织间的分布特点为试验目的。通过利用高度保守的菊花B病毒外壳蛋白编码基因序列设计引物和探针，建立TaqMan-MGB探针PCR扩增体系并优化扩增条件，对检测的最低检出限、病原特异性、稳定性和重复性进行评价，分析菊花B病毒在组织间的分布情况。结果建立了一种菊花B病毒TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR检测方法，该检测方法仅对菊花B病毒特异性扩增，最低检测病毒浓度为1×102拷贝/μL，组内变异系数≤1.51%，组间变异系数≤1.17%，最适退火温度为58 ℃，最适引物终浓度为800 nmol/L。最适探针终浓度为200 nmol/L，该检测方法具有特异性好、灵敏度高、稳定性良好和检测时间短等优点，通过对感染植株不同组织中病毒的载量进行分析，发现病毒分布存在组织差异，病毒载量为老茎＞脚叶＞根＞嫩茎＞嫩叶＞茎尖。本研究建立的菊花B病毒定量检测方法能够有效评估菊花感染的严重程度，为菊花B病毒的流行病学调查和筛选良好的脱毒苗组织材料提供技术支撑，从而促进菊花种植业绿色健康发展。

关键词：菊花B病毒;TaqMan-MGB探针;病毒分布;健康苗种