miR-199a-5p对鹅颗粒细胞凋亡的影响及其机制

来源：江苏农业科学杂志2020年第第23期北京时间：

作者：刘雅丽;荣玉静;胡深强;李亮;刘贺贺;何桦;夏露;胡继伟;胡博;王继文

单位：四川农业大学动物科技学院/畜禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室，四川成都 611130

摘要：为了揭示miR-199a-5p在鹅卵泡颗粒细胞凋亡中的作用及调控机制，本研究分离培养鹅等级卵泡颗粒细胞并转染miR-199a-5p相似物(mimic)和抑制物(inhibitor)，采用qPCR法检测细胞凋亡相关基因的mRNA表达量；为进一步探究其作用机制，结合RNAhybrid和Targetscan 7.0预测miR-199a-5p靶基因，然后在中国仓鼠卵巢细胞系(CHO)中采用双荧光素酶报告系统检测miR-199a-5p对血管生成因子A(vascular endothelial growth factor A，VEGFA)3′UTR荧光素酶活性的影响，最后采用qPCR检测miR-199a-5p对鹅颗粒细胞VEGFA表达量的影响。结果显示，过表达miR-199a-5p能显著升高BCL2/BAX比值(P<0.05)，显著下调Caspase3 mRNA表达量(P<0.05)；抑制miR-199a-5p则显著下调BCL2/BAX值(P<0.05)，对Caspase3 mRNA表达量无影响(P>0.05)。双荧光素酶报告载体系统发现，miR-199a-5p能极显著抑制VEGFA-WT报告载体荧光素酶活性(P<0.01)，但对VEGFA mRNA表达量无显著性影响(P>0.05)。上述试验结果表明，miR-199a-5p可能通过抑制BAX和Caspase3表达量来抑制鹅颗粒细胞凋亡，但在鹅颗粒细胞中miR-199a-5p是否通过VEGFA调控细胞凋亡需要进一步研究。

关键词：miR-199a-5p;VEGFA;颗粒细胞凋亡;鹅;mimic;inhibitor