僵蚕醇溶蛋白质的优化提取及其指纹图谱研究

来源：江苏农业科学杂志2020年第第22期北京时间：

作者：王立勇; 黄佳滢; 朱锐灵; 徐悦; 汤建; 闻崇炜

单位：1.江苏大学药学院，江苏镇江 212013； 2.亳州学院中药学院，安徽亳州 236800

摘要：为优化僵蚕醇溶蛋白质的提取工艺，并建立相应的SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)、HPLC(高效液相色谱)、FTIR(傅里叶变换红外光谱)指纹图谱。在单因素试验的基础上，利用响应面法，以提取率为响应值建立数学模型，获得最佳工艺，用SDS-PAGE、HPLC、FTIR建立僵蚕醇溶蛋白质指纹图谱。通过单因素试验考察乙醇浓度、料液比、温度、提取时间对僵蚕醇溶蛋白质提取率的影响，进而用Box-Behnken法设计4因素3水平试验，进行响应面回归分析。结果表明，僵蚕醇溶蛋白质的最佳提取工艺条件为料液比1g ∶24.22mL，乙醇浓度3873%，温度35 ℃，提取时间3.94 h，此时的提取率为0.540 2%。用SDS-PAGE、HPLC、FTIR法建立僵蚕醇溶蛋白质指纹图谱，SDS-PAGE分析结果表明，僵蚕醇溶蛋白质分子量集中在16.7~36.2 ku；HPLC分析结果表明，主要僵蚕醇溶蛋白质的保留时间为2.048 min与3.354 min，其含量分别占总蛋白量的31.23%与32.93%；FTIR分析结果表明，僵蚕醇溶蛋白质在2 927.71、1 631.71、1 457.24、1 310.71 cm-1处有主要吸收峰。研究并建立了僵蚕醇溶蛋白质的优化提取条件，并获得了蛋白质的SDS-PAGE、HPLC、FTIR指纹图谱。

关键词：僵蚕;醇溶蛋白质;响应面法;FTIR指纹图谱;SDS-PAGE;HPLC