蜂毒前溶血肽原基因的改造及其原核表达

来源：江苏农业科学杂志2020年第第16期北京时间：

作者：郭新军

单位：西安文理学院生物与环境工程学院/西安市秦岭天然产物开发与抗癌类创新药物研究重点实验室，陕西西安 710065

摘要：为进一步探讨利用基因工程技术生产蜂毒肽的方法，根据大肠杆菌密码子偏好性、基因GC含量、合成蛋白加工需求等对蜂毒前溶血肽原基因序列进行改造，并利用人工化学合成方法完成改造后全基因的合成。构建蜂毒前溶血肽原与GST融合表达重组质粒pGEX-4T-1/PPMel，转化大肠杆菌BL21感受态细胞后分别在20、37 ℃条件下经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达，并利用SDS-PAGE和Western Blot对产物进行检测。结果表明，表达体系成功表达了目的融合蛋白，在20 ℃条件下可获得可溶性表达产物，为进一步分离纯化目的蛋白及获得蜂毒肽提供了基础。

关键词：蜂毒前溶血肽原;蜂毒肽;原核表达;融合蛋白