大豆GmGolS基因的原核表达及抗旱性分析

来源：江苏农业科学杂志2020年第第14期北京时间：

作者：邱 爽; 何佳琦; 李铭杨; 翟莹

单位：齐齐哈尔大学生命科学与农林学院，黑龙江齐齐哈尔 161006

摘要：肌醇半乳糖苷合成酶(galactinol synthase，简称GolS)是棉子糖系列寡糖(raffinose family oligosaccharides，简称RFOs)生物合成途径中的关键酶，在植物应对非生物胁迫的过程中发挥着重要作用。通过逆转录(RT)-PCR从大豆叶片cDNA中扩增得到编码肌醇半乳糖苷合成酶的基因GmGolS，再将GmGolS基因构建到原核表达载体pET28上，然后将载体导入大肠杆菌Rosetta(DE3)中，对其进行异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalacto pyranoside，简称IPTG)诱导。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis，简称SDS-PAGE)结果表明，在诱导时间为3 h、IPTG浓度为0.1 mmol/L的条件下，可以获得大量重组蛋白，分子量约为40 ku。对表达GmGolS蛋白的大肠杆菌进行抗旱性分析的结果显示，GmGolS基因在大肠杆菌中的过表达降低了重组菌的生活力，使其对干旱胁迫更加敏感。

关键词：大豆;肌醇半乳糖苷合成酶;原核表达;抗旱性