响应面法优化仙茅多糖酶解工艺及体外免疫活性

来源：江苏农业科学杂志2020年第第8期北京时间：

作者：杨玲; 陈阳; 杨小生; 杨娟

单位：1.贵州大学药学院，贵州贵阳 550025； 2.贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室，贵州贵阳 550014；3.贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室，贵州贵阳 550014

摘要：采用葡聚糖酶对仙茅多糖XMP-1进行酶解，并利用响应面法对酶解工艺进行合理优化。在单因素试验的基础上，采用星点设计模拟葡聚糖酶酶添加量、酶解温度、时间、pH值等4个因素对还原糖生成量综合影响的模型，得到最佳工艺条件，并验证模型的可靠性。通过小鼠巨噬细胞(RAW264.7)分析XMP-1 1~12 h酶解得到的12批产物的体外免疫活性。结果表明，最佳酶解工艺为酶添加量为56%，温度为52 ℃，酶解时间为12 h，pH值为6.0，此时还原糖生成量为0.201 0 mg/mL。优化结果可靠，与预测值的相对误差小于5%。不同时间段酶解产物对细胞无明显毒害作用，均能诱导RAW264.7细胞活化，释放TNF-α和NO，其中酶解5 h的效果最好。该研究可为仙茅多糖酶降解片段的制备提供理论基础，也可为仙茅多糖在食品领域进一步开发和应用提供科学依据。

关键词：仙茅;多糖;葡聚糖酶;酶解工艺;响应曲面法;体外免疫诱导活性