重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测创伤弧菌

来源：江苏农业科学杂志2020年第第04期北京时间：

作者：凌莉; 席静; 王莹; 周广彪; 刘婧文; 魏霜; 李志勇

单位：1.广东检验检疫技术中心，广东广州 510623； 2.广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室，广东广州 510623；3.汕头海关，广东汕头 515031

摘要：为建立创伤弧菌的重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测方法，根据编码创伤弧菌DNA促旋酶的B亚单位蛋白(Gyrase Beta Subunit，gryB)的基因保守序列，设计RPA特异性引物，建立创伤弧菌gryB基因的RPA检测方法并测试其特异性、灵敏度和应用效果。结果发现，建立的RPA检测方法特异性好，能够从创伤弧菌中检测到234 bp的特异性条带，仅需在37 ℃下恒温反应40 min，不需要特殊的仪器设备；该方法的灵敏度与PCR相当，可达到0.1 ng/μL，应用检测结果也表明该方法与传统培养方法相当。因此，本研究建立的RPA方法检测gryB特异性强、灵敏度高，无需特殊的仪器设备，适合实验室快速检测。

关键词：创伤弧菌;gryB基因'gryB基因;RPA'RPA;检测