基于ITS2序列的藏当归及易混植物DNA分子鉴定

来源：江苏农业科学杂志2021年第第17期北京时间：

作者：姜钊;色里玛;李捷;陈依春;郝婷婷;孙芳云

单位：1.西藏民族大学藏药检测技术教育部工程研究中心，陕西咸阳 712082；2.西藏甘露藏药股份有限公司，西藏拉萨 851400

摘要：笔者所在实验室长期从事藏药基源鉴定与药物开发，为了确保试验药材的质量及临床安全用药，运用ITS2条形码技术对采自西藏的藏当归及相似植物进行分子鉴定。首先，利用试剂盒提取植物叶片的DNA，对ITS2序列进行PCR扩增，双向测序后运用SeqMan组装。而后，基于ITS2 Database中的Annotate注释方法去掉两端的5.8S区和28S区获得ITS2条形码并预测二级结构，用MEGA 5.0软件进行遗传距离计算并构建系统进化树(NJ)。分析发现，试验中的4种类似植物ITS2条形码间存在明显差异，结合二级结构、遗传距离、进化树位置及形态对比可知其分为3个物种并确定了其分类地位。试验证明，ITS2条形码可有效快速地鉴别易混中药材的种类，为保证其临床用药安全提供了简单、高效、准确的技术手段。

关键词：ITS2条形码;藏当归;系统发育分析;DNA分子鉴定