牡丹的基因组DNA提取与ISSR引物筛选

来源：江苏农业科学杂志2021年第第15期北京时间：

作者：李会云;程孟雪;李勇慧;刘忠艳

单位：洛阳师范学院生命科学学院，河南洛阳 471000

摘要：为了研究牡丹种质资源的遗传多样性和DNA鉴定，采用ISSR标记的方法来进行试验，即采用改良的CTAB法从成熟干燥的牡丹叶片中提取基因组DNA，其质量检测采用琼脂糖凝胶电泳法和超微量分光光度计法，用优化的ISSR-PCR反应系统，对加拿大哥伦比亚大学(University of British Columbia，UBC)公布的220条ISSR引物进行筛选。结果表明，从6个牡丹品种的叶片中提取的DNA浓度范围在30×10-3 ~100×10-3 μg/μL之间，DNA样品纯度 D260 nm/D280 nm 比值在1.7~1.9之间；从220条ISSR引物中筛选出了12条适合牡丹的扩增结果好的引物，选出的引物扩增条带清晰、多态性高、重复性好。说明提取的DNA质量较好，该改良的CTAB法适用于从蛋白质和酚类物质含量较高的植物材料中提取基因组DNA；筛选出的12条ISSR引物为进一步研究牡丹资源的遗传多样性奠定了基础。

关键词：牡丹;DNA提取;ISSR引物筛选;PCR扩增;改良的CTAB法