僵蚕碱溶性蛋白质的提取工艺优化及指纹图谱分析

来源：江苏农业科学杂志2021年第第3期北京时间：

作者：朱锐灵;黄佳滢;刘莹;徐悦;张林松;闻崇炜

单位：1.江苏大学药学院，江苏镇江 212013； 2.江苏省镇江市食品药品监督检验中心，江苏镇江 212050

摘要：建立稀碱法提取僵蚕蛋白质的最佳工艺，并对其进行相应SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)指纹图谱分析。单因素考察缓冲液pH值、液料比、提取时间和提取温度对僵蚕碱溶性蛋白质提取率的影响，随后以Box-Behnken组合设计响应面优化，对试验结果进行回归拟合分析，获得上述因素对碱溶性蛋白质提取率的量化关系，确定最佳提取条件，并对提取的碱溶性蛋白质进行SDS-PAGE指纹图谱分析。结果表明最佳提取工艺条件为：Tris-HCl(三羟甲基氨基甲烷盐酸盐)缓冲液pH值8.0、液料比58 mL ∶1 g，提取温度为40 ℃，提取时间为 205 min，此时碱溶性蛋白质提取率可达2.29%。SDS-PAGE指纹图谱结果表明僵蚕碱溶性蛋白质含有29.85、27.28 ku 2条迁移率相近的高丰度特征性条带，分别占总蛋白量的36.37%、32.65%，同时还有78.8、69 ku较高丰度特征性条带，该指纹图谱具有种属特异性。本研究建立了僵蚕碱溶性蛋白质的最佳提取工艺条件，所得SDS-PAGE指纹图谱可为僵蚕药材的分子鉴定提供参考依据。

关键词：僵蚕;碱溶性蛋白质;响应面;提取工艺;指纹图谱