禽腺病毒4型湖北株的分离鉴定及其Fiber2蛋白在乳酸菌中的表达

来源：江苏农业科学杂志2022年第第23期北京时间：

作者：李剑;徐鹏飞;叶十一;陈红心;周启立;翁长江;熊涛

单位：1.长江大学生命科学学院，湖北荆州 434000； 2.大北农集团湖北分公司，湖北武汉 430000；3.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，黑龙江哈尔滨 150069

摘要：为研究湖北地区禽腺病毒4型遗传进化情况及其Fiber2蛋白在乳酸菌中的表达情况，将采集于湖北省某养鸡场的病变组织样处理后接种至LMH细胞，分离出2株禽腺病毒，通过PCR鉴定和Hexon基因测序分析表明为禽腺病毒4型，并命名为HBJZ2021A和HBJZ2021B，遗传进化树分析结果表明，其与国内山东、浙江和北京等地区的毒株亲缘关系较近，处于同一进化分支。以其基因组DNA为模板扩增Fiber2基因并克隆至乳酸菌表达载体pNZ8148，通过酶切和测序表明成功构建了重组表达载体pNZ8148-Fiber2，并通过电转转化至NZ 9000乳酸菌，采用不同浓度梯度的Nisin进行诱导表达，SDS-PAGE及Western-Blot分析结果显示，成功在上清中表达了Fiber2蛋白。该研究结果为湖北地区禽腺病毒4型的流行情况及其口服疫苗的开发提供了参考依据。

关键词：禽腺病毒4型;分离鉴定;遗传进化;Fiber2蛋白表达;基因测序