甜菜夜蛾U6 snRNA的克隆及其表达稳定性分析

来源：江苏农业科学杂志2022年第第17期北京时间：

作者：刘志成;张钧博;方正;吴庆珊;翁庆北

单位：1.贵州师范大学生命科学学院，贵州贵阳 550001； 2.黔南民族师范学院，贵州都匀 558000

摘要：U6 snRNA是真核生物主要剪接体的重要组分，在不同物种中保守且表达水平稳定。为评估甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)U6 snRNA是否适合作为miRNA(microRNA)定量表达检测内参基因，本研究通过克隆甜菜夜蛾U6 snRNA全长序列，分析其进化保守性及与其他物种U6 snRNA的系统进化关系，并进一步探究除虫菊提取物、高温培养和甜菜夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera exigua multiple nucleopolyhedrovirus，SeMNPV)感染胁迫下U6 snRNA的表达稳定性。结果表明，克隆的甜菜夜蛾U6 snRNA全长107 nt。多序列比对和系统进化分析表明，不同物种U6 snRNA具较高保守性，甜菜夜蛾U6 snRNA与其他鳞翅目昆虫的系统进化关系最近。利用终浓度为LC50的除虫菊提取物或36 ℃高温培养胁迫处理Se301细胞，以及SeMNPV感染甜菜夜蛾幼虫(72 h)，U6 snRNA均表达稳定。研究结果可为甜菜夜蛾miRNA表达检测内参基因的选择提供依据。

关键词：甜菜夜蛾;U6 snRNA'U6 snRNA;克隆;表达稳定性;小RNA;内参基因